一、灭菌法定义
用适当的物理或化学手段将物品中活的微生物杀灭或除去的方法。适用于制剂、原料、辅料、医疗器械等的灭菌。
灭菌是指将物品中污染的微生物残存概率下降至一定水平,以无菌保证水平SAL(Sterility Assurance Level)表示。
二、灭菌程序验证内容
1、撰写验证方案及制定评估标准。
2、确认灭菌设备技术资料齐全、安装正确,并能处于正常运行。
3、确认关键设备控制仪表在规定的参数范围内能正常运行。
4、采用被灭菌物品或模拟物品进行重复实验确认灭菌效果符合规定。
5、完善文件记录,撰写验证报告。
三、灭菌程序运行监控
1、 关键参数应在验证确定的范围内:温度、压力、时间、湿度、灭菌气体浓度、辐照剂量等
2、灭菌程序定期验证,时效不超过半年。
3、灭菌设备或程序发生变更重新进行验证。
四、灭菌保证
1、灭菌效果与灭菌前产品污染程度及污染菌特性有关,把握微生物污染水平及污染菌耐受性,注意各个环节降低污染程度。
2、灭菌冷却阶段防止已灭菌物品再次污染。
3、适用生物指示剂、化学指示剂等监控灭菌结果。
五、生物指示剂
基本要求:
1、菌种的耐受性应大于需灭菌产品中所有可能污染菌的耐受性。
2、菌种应无致病性。
3、菌株应稳定,存活期长,易于保存。
4、 易于培养。若使用休眠孢子,孢子含量在90%以上。
六、常用生物指示剂
1、湿热灭菌:嗜热脂肪芽孢杆菌孢子(ATCC7953等,活孢子数为5×105~5×106个/片 )
2、干热灭菌:枯草芽孢杆菌孢子(ATCC9372等,活孢子数为5×105~5×106个/片 )
3、辐射灭菌:短小芽孢杆菌孢子(ATCC27142等,活孢子数为5×107~5×108个/片 )
4、气体灭菌:
环氧乙烷灭菌:枯草芽孢杆菌孢子(ATCC9372等,活孢子数为5×105~5×106个/片 );
气态过氧化氢灭菌:嗜热脂肪芽孢杆菌孢子(ATCC7953等,活孢子数为1×106~5×106个/片 );
过滤除菌法:缺陷假单胞菌( ATCC19146等)。
七、灭菌方法
方法:湿热灭菌法、干热灭菌法、辐射灭菌法、气体灭菌法、过滤除菌法。
根据灭菌物品特性选择一种或几种方法组合灭菌。只要产品允许,尽可能选用灭菌法。