重庆3M测试片
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关于3M测试片的接种的使用及判读方法

2023-03-03

  3M菌落总数测试片


  1.操作方法


  ①没有开封的时候,放在≤8℃冷藏,注意外包装上的保质期。打开包装时,应在室温下。如果已经打开,用压条或胶带密封,放在室温下,一个月内用完。


  ②将样品放入无菌均质袋或均质杯中,加入无菌稀释剂搅拌或均质样品,用稀盐酸或稀氢氧化钠调节pH至6.5~7.2。


  注:含有柠檬酸盐、酸性亚硫酸盐或硫代硫酸盐的缓冲液不能用于无菌稀释液,这会抑制细菌的生长。


  ③将测试片放在平坦的表面,保持水平,揭开上层膜,将1毫升样液垂直滴入移液器或滴管中心。然后慢慢把上层膜掉下来,尽量不要有气泡,不要把上层膜往下滚。


  ④将压板的圆形内凹面朝下,放在上膜中央,然后轻轻按压,使样液均匀覆盖在圆形培养基面积上,切勿扭转压板。


  ⑤拿起压板,静置1分钟以上,等待培养基凝固。然后测试片的透明面朝上,*可以叠放20片,放置在36℃,培养48小时,保持培养箱的湿度。


  2.判读方法


  ①无论大小和颜色深浅,菌落总数测试片中都含有一种红色指示染剂,能使菌落呈红色,便于计数,计算出所有的红色菌落。


  ②在25~250范围内,3M检测片菌落计数合适。


  ③测试片的计数面积约为20cm2。每个黄色方框的面积为1cm2。当菌落总数超过250时,可以选择其中一个或几个有代表性的小方框(1cm2)来估计菌落数。计算平均菌落数,然后乘以20得到测试片上的菌落数。


  ④如果测试片上的菌落太多而无法计数,则记录为“TNTC”。


  ⑤菌落数量较高,使整个生长区域变成粉红色,或者只是观察到生长边缘区域的单一菌落,记录为“TNTC”。


  ⑥菌落数量较高,有时菌落分布不均匀,记录为“TNTC”。


  ⑦可以看到直径较大的菌落,可以计数。但是,如果你仔细观察,你会发现计数区域分布着非常密集和微小的菌落,此时记录为“TNTC”。


  ⑧少量菌种会液化测试片上的培养基,计数区域会出现粉红色的液化区。此时,液化区域内的红点不应记录。应选择几个没有液化部分的有代表性的小方块(1cm2),而不是液化区域内的菌落进行计数。计算平均菌落数,然后乘以20。得到结果。


  ⑨注意样品残渣颗粒的区域。有些样品含有一些红色残渣颗粒,菌落应该是红色规则的圆形,而颗粒的形状是不规则的。如果样品主要是红色颗粒(如辣椒粉),则不应使用3M菌落总数测试片来检测此类样品的菌落总数。


  3M大肠杆菌/大肠菌群测试片


  1.操作方法


  操作方法与3M菌落总数测试片基本相同,只需将1毫升样液加入中间红色圆形区域,无需压板,然后轻轻放下上膜,尽量不要产生气泡。然后你可以轻轻转动纸片,这样样液就可以均匀地分布在中间的红色圆形区域。


  2.判读方法


  大肠菌群在纸上呈现红色菌落,紧贴菌落有气泡,大肠杆菌在纸上呈现蓝色菌落,紧贴菌落,有气泡。这时候要注意区分只有红色或者蓝色菌落没有气泡的情况,或者气泡没有紧贴菌落,或者只有气泡没有菌落生长,不应该包括在计数范围内。此外,还应区分样品残渣和目标菌落。


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