3M检测片针对细胞培养和消化

细胞培养大致分为两种，一种是悬浮细胞培养，一种是贴壁细胞培养，无论是哪种方式，进行细胞培养时一般会通过以下几个步骤：

细胞准备—细胞传代—细胞培养基配置—细胞接种—培养条件控制—细胞观察和培养—细胞实验—细胞冻存

当然以上只是细胞培养过程的一个基本框架，实际操作可能会因细胞类型、实验要求和实验室的标准操作规程而有所不同。

细胞消化是研发人员在操作细胞培养过程中一个步骤，一般细胞长至80%-90%密度则需要传代消化，贴壁细胞传代前，需要把细胞用消化试剂从培养容器表面解离出来，细胞得以分离成单个悬液传代至含新鲜培养基的新容器内；常见的细胞消化方法有三种：酶消化法、离子螯合法、机械消化法。其中，酶消化法是用得很多的，主要使用胰蛋白酶，一般浓度在0.25-0.5%，消化的时间根据细胞种类、作用温度等因素而变化。一般来说，0.25%的胰酶作用于单层贴壁的细胞，在37℃条件下消化1-5分钟就足够了。需要注意的是，Ca2+、Mg2+和血清、蛋白质可降低胰酶的活性，因此不含Ca2+、Mg2+，含EDTA的胰酶活性更高; 可用含血清的培养基终止胰酶消化。

 胰蛋白酶大致可以分为两种，一种是传统使用的动物源性的胰蛋白酶，主要提取自牛或猪的胰腺组织，其缺点是会带来病毒污染的风险；另一种则是非动物源性胰酶，即利用基因重组技术生产的重组胰蛋白酶。重组胰蛋白酶具有许多潜在用途，包括用于生产药品、用作研究工具以及生物技术应用，例如蛋白类药物的生产、细胞的分离、疫苗生产以及用于细胞分析的组织样本的制备，同时解决了传统使用的猪或牛胰蛋白酶可能带来病毒污染的风险。我国2020版药典一次收录了无动物源性重组胰蛋白酶的质量标准。总体而言，重组胰蛋白酶在生物药及科研领域是不可缺少的工具酶。